胰胨-亚硫酸盐-环丝氨酸(TSC)HiVeg琼脂
Perfringens HiVegTM Agar Base(T.S.C./S.F.P. HiVeg Agar Base)
原理和说明
TSC琼脂由Harmon等人【1】研发,最初用于食物中的产气荚膜梭菌的计数。
该培养基是对胰胨-亚硫酸盐-环丝氨酸琼脂(TSC)的改进,用HiVeg 1号水解物和HiVeg提取物
研发的。HiVeg的植物蛋白胨替代动物源性蛋白胨后,培养功效完全一致,且:
(1)批间差异更小,
(2)增菌时由于动物蛋白造成的干扰因素更少,
(3)避免疯牛病(BSE / TSE)、口蹄疫等相关动物病毒的风险,
(4)对实验人员及实验环境更安全。
此产品完全无动物源成份。
无卵黄的TSC琼脂已被证明是最常用的产气荚膜梭菌定量回收的培养基,且能抑制几乎所有兼性厌氧菌的生长。对于产气荚膜梭菌芽孢的计数,无卵黄的TSC琼脂优于MPN升温法(46℃)【2】。
培养基中包含HiVeg 1号水解物,大豆粉酶解物,酵母提取物。
HiVeg提取物提供梭菌生长所必需的含氮化合物,碳,硫,维生素B复合物和微量元素。焦亚硫酸钠和柠檬酸铁铵作为亚硫酸盐还原反应的指示剂,使菌落呈现黑色。
大部分产气荚膜梭菌菌株由于有卵磷脂酶的活性,可能会在菌落周围形成不透明区域。但有些产气荚膜梭菌菌株可能有例外,因此还需要进一步验证。
组成
配制
在475ml蒸馏水中重悬23.5克干粉培养基。加热沸腾直至完全溶解。高压灭菌(15磅121℃ 15分钟)。冷却至50℃。 加入25ml卵黄乳液(货号FD045)和1管复溶的S.F.P. 添加剂(货号FD013)或 T.S.C.添加剂(货号FD014)。混匀后倒入无菌培养皿。
质量控制
外观
黄色均匀自由流动的粉末,可能有轻微绿色痕迹。
制备的培养基颜色和透明度
基础培养基为淡琥珀色轻微不透明凝胶。添加了TSC添加剂(货号FD014)后,形成不透明的凝胶。当加入卵黄乳液(货号FD045)时,培养皿中形成黄色不透明凝胶。
pH值
7.40-7.80
培养反应
加入添加剂后,厌氧条件下35-37℃孵育18-48小时,观察培养特征。
图. 胰胨-亚硫酸盐-环丝氨酸(TSC)琼脂
左:对照
右:产气荚膜梭菌
储存和保质期
30℃以下密闭保存。配好后的培养基在2-8℃保存。在标签上的效期前使用。
参考文献
1. Harmon S.M., Kauttar D.A.and Peiler J.T., 1971, Appl. Microbiol., 22:688.
2. Harmon S.M., and Kauttar D.A., 1987, J. Asso. off Analchem., 70:994.